Tris緩沖液在DNA提取中的功能是什么？

Tris（三羥甲基氨基甲烷）是一種常見的生物緩沖液，可用于整個DNA提取過程。從多種來源提取過程中，DNA對pH敏感。在細胞裂解，去除不需要的細胞成分和沉淀過程中，可以使用tris來維持穩定的pH值。另外，它在細胞裂解中也起到特別重要的作用。

Tris保護DNA免受pH值變化的影響

TRIS可以保持穩定的pH值，pKa為8.1，有效緩沖范圍值為7至9，由于其中性范圍，Tris是生物學實驗室中常用的緩沖液。當細胞分裂時，它們的DNA和內容物會溢出到緩沖液中。RNase A（破壞RNA），蛋白酶（破壞蛋白質）和SDS（十二烷基硫酸鈉，溶解膜片段）這種細胞內含物以及片段化的RNA和蛋白質的湯對溶液的pH值有很大的影響。因為DNA對pH敏感，所以Tris緩沖并使pH保持穩定很重要。

TRIS可促進細胞裂解

裂解或裂解細胞是DNA提取的第一步。這可以通過含有tris和EDTA（乙二胺四乙酸）的緩沖液來完成。EDTA結合二價陽離子（例如鈣和鎂）。由于這些離子有助于維持細胞膜的完整性，因此用EDTA消除它們會破壞細胞膜的穩定性。Tris是主要的緩沖組件，它的主要作用是將緩沖液的pH值維持在一個穩定的值（通常為8.0）。此外，Tris可能會與膜中的LPS（脂多糖）相互作用，從而進一步破壞膜的穩定性。

DNA必須在tris緩沖液中才能使用

在DNA提取的最后階段，從溶液中提取DNA本身。此時，DNA可溶于緩沖液中。為了從溶液中提取，可通過添加乙醇或異丙醇（異丙醇）使DNA不溶。完成此操作后，DNA會在溶液中以白色線狀物質的形式出現。盡管可以以這種方式從剩余的細胞成分中分離出DNA，但是當DNA不溶時，它是“不可用的”。分離后，將酒精除去，必須將DNA放回生物緩沖液（如tris）中才能使用。

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